二战期间，希特勒在世界各地召集考古学家寻觅“丢失的约柜”——圣经中引导希伯来人与天主沟通的圣物，希特勒欲借其来护佑纳粹的战役。　　为了使希特勒的计划幻灭，印第安纳琼斯博士（Harrison Ford饰）奔赴尼泊尔，一边奋力发掘蛛丝马迹，一边还要与无孔不入的纳粹分子斡旋。凭借着过人的才智和异于常人的胆量及大无畏的勇气，琼斯终于在罗马找到了指示约柜方位的太阳手杖，继而发现了约柜。　　就在功德圆满之际，纳粹军却侵吞了胜利果实，还将琼斯等人留在了蛇穴里！可是无往不胜的琼斯总是有方法九死一生，并狠狠地还以色彩！