故事发生在抗日战争时期。因军统谍网连遭日特损坏，戴笠（王岗 饰）从集中营选出因故做牢的陈一鸣（庹宗华 饰）少校，令他组成“眼镜蛇”奸细小组，暗算日特驻华头子中村一郎（于震 饰），领命后陈一鸣立刻招募各路高人进行训练。这时，美军上校梅乐斯找到戴笠，要他设法营救被中村拘捕的美奸细史密斯夫妇。中共高档奸细黄天明（侯勇 饰）得到南京黄云睛（吴晓敏 饰）送来的情报，他奉上级指示，将史密斯夫妇所在位置故意走漏给军统南京站高站长，陈一鸣带着奸细小组出发了。他们扮装混入医院，先救出了史密斯夫妇，然后履行此次来的首要任务：刺杀中村一郎，他们能顺利完成任务吗……